1. 概述:
苏丹红ELISA检测方法适于食品种的定量或定性检测,可检测番茄汁、番茄酱、辣酱汁、辣椒酱,辣椒粉,萃取和稀释程序请参看技术公告。检测结果需要HPLC,GC/MS或其他方法确证。
2. 安全说明
试剂盒中的标准溶液含有少量的苏丹红。此外,底物溶液中含有四甲基邻苯二胺,终止液中含有盐酸。应避免皮肤和粘膜接触终止液。如果此类试剂接触到皮肤,应用水冲洗。
3.保存和稳定性
苏丹红ELISA试剂盒需冷藏(4-8℃)。所有试剂在使用前应该平衡到室温(20-25℃)。试剂可以使用至有效期。
4. 检测原理
本试剂盒基于抗体识别苏丹红的原理。苏丹红HRP标记物与标样及样品提取液中的苏丹红竞争与溶液中的兔抗苏丹红抗体结合。苏丹红抗体与包被板上的二抗结合。经洗涤步骤后加入底物,显色(蓝色)。经20min孵育,反应被终止,颜色变为黄色,读取各孔OD值。比较未知样品的颜色和标样的颜色,就可得出样品中的苏丹红浓度。用每个标准样品点绘制出标准曲线,样品浓度在标准曲线内查出。
5.本试剂盒的局限和可能产生的干扰
经测试食品样品如番茄汁、番茄酱、辣酱汁、辣椒酱,辣椒粉,经稀释缓冲液稀释起到很好的去除基质反应的效果,大多数样品中的有机和无机物经测试对本反应没有影响。然而,由于样品成份的多样性,不能完全避免矩阵反应的干扰。一些其他的食品有可能需要不同的稀释,并需要确认有效性。
误错误的操作可能导致错误,如:试剂盒缺乏必要的储存条件,错误的加液顺序或加液量,底物孵育时间过长或过短,在测试过程中反应温度超出范围(低于10℃或高于30℃)。
苏丹红ELISA试剂盒提供了初筛的结果,同其他方法(GC,HPLC等)一样,结果需经其他方法确证。
A提供的试剂及材料
1. 用铝箔袋真空包装的96孔板(Microtiter plate) (12×8条),包被二抗(抗兔),内含指示干燥剂。 |
2. 浓度分别为 0,0.25,0.50,1.0,3.5,5.0ng/ml(ppb) 的6瓶苏丹红标准液(Calibrator/Standard)。 |
3. 1 瓶6mL 苏丹红HRP酶标记物. (Sudan Red-HRP Conjugate) |
4. 苏丹红抗体溶液 (Anti- Sudan Red Antibody solution)6ml |
5. 1 瓶 12 mL 底物(Substrate). |
6. 1 瓶 6 mL 终止液(STOP SOLUTION). (小心操作) |
7. 5×浓缩洗液Wash Solution,用去离子水或蒸馏水稀释5倍。 |
8. 样品稀释液Sample Diluent 30ml |